过氧化物酶 检测介绍
过氧化物酶是一种氧化还原酶,广泛分布于自然界中,具有催化过氧化物的活性。它们能够将底物的氧化还原反应催化至具有特定的中间体,从而延长底物的存活期及改善其物理性质。
过氧化物酶的辅基为血红素,以H2O2为电子受体催化底物氧化的酶,它催化H2O2直接氧化酚类或胺类化合物,具有消除过氧化氢和酚类胺类毒性的双重作用。在细胞内,过氧化物酶主要分布在乳汁、白细胞、血小板等体液或细胞中,它们在生物体的先天免疫防疫、植物微生物抗氧化应激、真菌木质素降解、植物细胞壁代谢及伤口愈合等重要生命过程中发挥作用。
中科检测是专业的医药制剂检测机构,可开展过氧化物酶检测服务。
过氧化物酶 检测范围
过氧化物酶按照所催化的底物分类,可以分为多种类型,最常见的是氢过氧化物酶和过氧化氢酶。
除了这两种常见类型之外,还有一些其他类型的过氧化物酶。比如,过氧化物酸酯酶催化过氧化丙酮酸的分解,产生丙酮酸和二氧化碳;过氧化酰胺酶催化过氧化酰胺的分解,产生氨和乙酰胺等各种类型的过氧化物酶在分子结构和催化机理上都有所不同。
过氧化物酶 检测方法
1.分光度法
最常用的比色法系采用邻-联(二)茴香胺作为氢的供体(DH2),然后,于460nm处跟踪所生成的氧化型染料色度。一个单位的过氧物酶即定为每分钟分解1微克分子的过氧化物所需的酶量在过氧物酶比色分析中,曾试用了各种不同的染料。若测定谷物与面粉中的过氧物酶,采用还原性的2,6-二氯靛酚作氢供体,当有过氧化物存在,即会呈现蓝颜色。测定牛奶中的过氧物酶时,曾使用了邻-甲氧基苯酚,联苯胺和其它可氧化性的底物,如维生素C、尿酸、细胞色素c和丁子香酚等。
2.电化学法
测定过氧化氢酶的电位法,亦可应用来测定过氧物酶的活性。将二个铂电极浸在过氧化物溶液中,当电极上输入2微安的微电流时,则由此呈现出一个平稳的0.40伏的起始电压。当加入过氧物酶时,电压即增加,直至达到从水释放出氧所产生的电压为止。在0.01~1.0单位/毫升的酶活性范围内,此曲线的斜率(电压差值/时间差值)与过氧物酶的浓度成正比。由于过氧物酶需要有氢供体以利酶的催化功能的发挥,所以选择的供体无论是氧化型还是还原型,它们在所用的电压下均为不具有电活性的化合物(如连苯三酚)。
3.荧光法
用荧光法测定过氧物酶的活性时,选用了高香草酸(HVA)作为指示剂。无荧光的高香草酸能被氧化成有强烈荧光的二聚物,其激发波长为315nm,发射波长为 425nm。在过氧物酶浓度为每毫升10-3~2单位范围内,生成荧光产物的速度与该酶的活性成正比。
过氧化物酶 检测标准
GB/T 32131-2015 辣根过氧化物酶活性检测方法 比色法
GB/T 37966-2019 纳米技术 氧化铁纳米颗粒类过氧化物酶活性测量方法
YY/T 1458-2016 抗甲状腺过氧化物酶抗体定量检测试剂(盒)(化学发光免疫分析法)
YY/T 1207-2013 尿酸测定试剂盒(尿酸酶过氧化物酶偶联法)